Сряда Ploskirev (Bactoagar F): описание. Медицинска микробиология

Околната среда на Ploskirev (също наричана Bactoagar G) е хранителна среда

история

Николай Иванович Плоскирев е съветски микробиолог и почетен лекар на RSFSR. Той е роден през 1869 г. и умира през 1948 г., като по-голямата част от живота си работи в родния си град - Томск.

През 1888 г. той, бъдещ учен, не завършва шести клас в училище, влязъл във военната служба. Той завършва обучението си едва през 1892 г., след което издържал изпити за допускане до Университета на Имперския Томск, обучавал се в Медицинския факултет. През 1898 г. получава титлата лекар.

Плускирев участва в Руско-японската война, а след това работи в болницата в Томск. През 1910 г. е назначен за ръководител на Дерматоенергологичната болница в Томск и за 30 години е постоянна глава. По същия начин ученият е бил един от основателите на дерматологичен и венерологичен диспансер в Томск.

Николай Иванович Ploskirev написа серия от произведения, посветени на борбата с венерически болести.

структура

Сряда Ploskirev - материал за отглеждане на чревни бактерии, и следователно, трябва да съдържа няколко вида хранителни вещества. Произвежда се в суха форма.

Панкреатичният хидролизат от цаца (10,4 g / l) има доста голям дял в общата му маса. Малко по-малко е необходимо за динатриев хидроген цитрат (8,5 g / l). Също така съдържа сух хранителен бульон и млечна захар (8.62 и 7.3 g / l).

Вторият заглавието Ploskireva среда - J. бакто-агар в състава е в количество от агар, 6.94 г / л. Съдържанието на безводен натриев сулфат е равно на 5,1 g / l. Има присъствието на безводен динатриев фосфат - 2.1 гр / л, натриеви соли на холинова киселина около 3.46 гр / л и сода - 2,4 гр

По-малко грам съдържа индикатори - неутрално червено (0.05) и брилянтно зелено (0.0002). Съдържанието на йод е 0.13.

приложение

Проучването на биохимичните процеси на бактериите играе много важна роля в диагностицирането на заболявания, които причиняват анаеробни организми. Видовете, които съставляват това семейство, са стотици. Те са почти идентични в морфологията и културните свойства, а най-надеждният начин да се разграничат един от друг е да се проучи биохимията.

Проучването започва с засяването на патологичния материал в хранителната среда. Това е диференциално патологично за чревната група от бактерии, а неговият състав, в допълнение към месо-агарния агар, включва индикатор и лактоза. Способността да се обработва лактозата е важен знак за диференциация на ентеробактериите. Ако това се установи, рН се измества към киселинността и индикаторът, който оцветява колонията, се задейства.

Други страни могат да използват друг хранителен медии, но техния механизъм на действие съответства на трите най-често срещани в Русия - тази среда Ендо и Ливайн Ploskireva сряда.

Описание на метода

В чужбина еквивалентът на околната среда на Ploskirev е така нареченият агар MacConkey. В готовата форма разтворът е прозрачен, има светло розово-жълт оттенък. Колонии, способни да обработват лактозата в средата на Плоскирев, се дават в червено (червена боровинка). Ако бактерията не може да я обработва, колонията е безцветна или слаба.

С оглед на факта, че съставът на средата на Ploskirev включва вещества, които подтискат (диамант зелено, жлъчни соли, йод), е почти напълно инхибира растежа на грам-положителни флора, както и в първия ден eshehiry значително забавя растежа, както и други обичайни съпътстващи микрофлора.

Вторият етап

След това се извършва селекция от интересуващата се колония и се засява до основната диференциация и натрупваща се среда. Медиите, на които се извършва засяването, трябва да съдържат няколко подложки. Бактериалната култура трябва да открива ензимна активност към тях, освен че средата се намира в епруветките, така че има две секции:

• тази, на която агарът е наклонен;
• с колона.

Колонията, която представлява интереса на изследователя, е населена на наклонената част с гъст удар, а в колоната - с бод. На този етап се използват медиите на Ръсел, Клиглер или Олекински. Като диференциална диагностика се използва и средата на Ploskirev.

Микробиология и патогени

Агарът на Ploskirev е важен фактор при откриването на инфекции, причинени от ентеробактерии. Така например, той расте и диференцира колонии от микроорганизми, които са причинителите на бактериалната дизентерия. Това са анаеробни организми, които влизат в род Шигела.

Като всички, които са част от семейството на чревните бактерии, Shigella са вид пръчки с размери два микрометра. Те не образуват капсули и спори, нямат фланела - това им позволява да се различават от салмонелата, която на свой ред е мобилна. Те перфектно растат в най-простата среда, при температура, която е малко над стайната температура (35-37 ° C) и 7.4 pH. По природа на растежа колониите не се различават от салмонела.

Както е посочено по-горе, микроорганизмите могат практически да нямат морфологични различия, но те се различават значително в биохимичните процеси на жизнената активност. Така че, с изключение на Shigella Newcastle, ферментацията на въглехидратите е образуването на киселина без газ. С изключение на Shigella Sonne, те не могат да ферментират лактоза, но разграждат глюкозата. Само за техните основни характеристики може да се отдаде на факта, че те могат да намалят нитрацията до нитрит. Техните колонии не разцепват карбамид, а в хранителната среда няма втечняване на желатин.

Събиране и приготвяне на инокулум

За откриване на патогени на дизентерия са необходими микробиологични изследвания на заразените медии, т.е. движенията на червата на пациента. След получаване на материала е необходимо да се посее възможно най-скоро. Ако това не е възможно, източникът трябва да бъде поставен в консервант - смес от фосфатен буфер или глицерин. При температура 4 ° C те могат да се съхраняват за не повече от един ден. Събирането на материала трябва да се извършва с ректална стъклена тръба, която се поставя в ректума.

За изследване на материала се избират лиофилни гънки, които трябва да бъдат измити в две или три епруветки от изотоничен разтвор на натриев хлорид.

Прилагането на патогенни бактерии в средата на Ploskirev се извършва със стъклена шпатула. Необходимо е в малка площ да се търкат в агар, след това да се отреже шпатула от средата и остатъчният материал да се втрие в незапечатаната повърхност. Ако се засяват няколко чаши, всеки от тях трябва да бъде посевен с нова порция.

Ако муко-гнойни парчета там при вземането на специален анализ, това не означава, че няма наличие на патогени. В такъв случай е необходимо да се емулгират изпражнения в 10 мл натриев хлорид (концентрация 0,85%) и след това сее една или две капки в среда Ploskireva. Емулгираното изпражнение може да се посее в селенитната бульон. Използва се и в случай на повръщане или измиване на вода вместо изпражнения.

Микробиологична диагностика

На първия етап на микробиологичните изследвания, патогенните бактерии се поставят в две чаши, а след това да се наблюдава как расте шагилата. На средата на Ploskirev се произвежда една култура, втората е на средата на Levin или Endo.

С оглед на появата на щамове Shigella, резистентни към антибиотици, левомицетин се добавя към средата. След това в рамките на 24 часа се извършва инкубация в термостат при температура 37 ° С.

На втория ден трябва да изучавате израстналите колонии. Тези, които не израстват безцветни в диференциална диагностична среда, трябва да бъдат отрязани на средата на Ръсел или кратка "пъстър серия". Допълнителни изследвания се извършват в съответствие с алгоритъма на основните култури върху тях. Колониите на shigella на средата на Ploskirev растат под формата на прозрачни, безцветни и малки колони. Те са два вида:

• сплескани с назъбени ръбове;
• Закръглени, изпъкнали, с характерен влажен блясък.

Три или четири колонии трябва да бъдат микроскопирани и изследвани за мобилност. В случай, че последният не е намерен, те се преместват в средата на Олсенецки, за да извлекат чиста култура. При отсъствието на характерни колонии на shigella или ако изобщо няма растеж, е необходимо да се произвежда селенит бульон върху Endo или Ploskirev агар. Ако присъстват типични колонии в достатъчни количества, се поставя приблизителна реакция на аглутинация. Използва се смес от sera Sonne и Flexner, реакцията протича на стъклото.

Допълнителни изследвания

На третия ден се отбелязват промените, настъпили в колониите в района на Russellian. Ако има една култура, която не се разгражда лактозата и глюкоза ферментира за получаване на киселина, се отделя и анализира, прекарват микроскопия, както и извършва посев в "пъстър ред", но този път се разширява. По аналогичен начин, тестът за аглутинация се извършва за целите на серологичната идентификация.

В последния ден, може да се заключи, въз основа на промени в "пъстър номер" (ако има ферментация на въглехидрати), както и обобщава реакцията на аглутинация.

Съхранение и подготовка

Приготвянето на агломера на Ploskirev е, както следва:

1. 55 g сухо вещество се разбърква в литри дестилирана вода.
2. Сварете в продължение на две до три минути, докато агарът напълно се разтопи.
3. Изсипете в петриеви блюда (стерилитета е по избор) със слой от 5-6 мм.
4. Чашките са оставени отворени за час и половина при стайна температура (18-25 градуса). В края на това време средата ще замръзне и изсъхне достатъчно.

Околната среда на Ploskirev е чувствителна към светлина и хигроскопична. Прахът трябва да се съхранява в запечатана опаковка, относителната влажност на въздуха в помещението да не надвишава 60%. Оптимална температура на съхранение от 2 ° C до 25 ° C Необходимо е да се спазват тези правила за съхранение, в противен случай могат да възникнат неточни резултати от изследванията.