Флуоресцентна микроскопия: характеристики на изследването

Терминът "микроскопия" има гръцки корени. В превода, това означава проучване на предмети, използващи високо прецизни инструменти. Напоследък все по-популярна стомана луминисценция и електронна микроскопия

резолюция

Под нея, като правило, да се разбере минималното разстояние, на което могат да бъдат ясно разграничими обекти. Разделителната способност на оборудването ще определи степента на проникване в микроскопичния свят, възможността за разглеждане на размера на елемента, който е обект на изследване. С голямо увеличение на границите на обекти може да се слее. Съответно има определени граници, извън които сближаването на елементите е безсмислено.

Метод на луминисцентната микроскопия: механизъм

При преобразуването на абсорбираната от веществото енергия, в видимо излъчване има сияние. Тя се нарича луминисценция. Този феномен се дължи на факта, че някои вещества под влиянието на светлина започва да излъчва лъчи от друга (обикновено големи) дължина на вълната. В допълнение, някои обекти, които имат определен цвят при нормално осветление, под влияние на ултравиолетова светлина, променят цвета си.

специфичност

Един обект, който не може да се разглежда под ултравиолетова светлина, могат да излъчват ярка блясък, ако се третира със специално вещество. В нея елементите блестят в различни цветове в тъмното. Радиационната мощност е различна, но по правило тя е малка. В тази връзка флуоресцентната микроскопия е ефективна в затъмнена стая. Когато се използва този вид изследване, обектът се разглежда в светлината, която той излъчва. Химическият състав на тъканите, клетките ще повлияе върху качеството на изследването. Светлинната микроскопия се счита до известна степен за хистохимично изследване.

класификация

Флуоресцентна микроскопия могат да бъдат първични или вторични. В последния случай обектът се обработва със специални съединения, които дават блясък. първичен флуоресцентна микроскопия се основава на вътрешната способност на изучавания елемент да излъчва светлина.

оборудване

Луминесцентната микроскопия се извършва с помощта на различни устройства. Осветителят служи като основен елемент. Той е оборудван с ултравиолетова лампа. Освен това устройствата използват набор от филтри. При някои устройства има доста различни конфигурации. В зависимост от цвета, използван за възбуждане на луминисценцията - ултравиолетов или син, се поставя подходящ филтър между светлинния източник и обекта, който се изследва. Тъй като светлината на микроскопичния елемент е енергийно по-слаба от вълнуващата светлина, тя ще бъде хваната само при едно условие. Излишъкът от лъчите, идващи от източника, трябва да бъде отрязан от жълто-зелен филтър. Той се поставя на окуляра на устройството. Най-силният ефект от луминисценцията ще бъде, когато филтърът изцяло отреже лъчите, излизащи от източника на светлина.

Какво представлява инсталацията на видимо излъчване? Той има източник на ярка светлина и биологичен микроскоп. Между огледало единица и лампа, монтирана синьо-виолетов филтър. Тя може да бъде FS-1, UFS-3 и така нататък. Жълтият филтър се поставя върху окуляра на микроскопа. С тяхна помощ синьо-виолетовата светлина пада върху обекта. Той също така вълнува луминисценцията. Но тази светлина може да възпрепятства виждането на блясъка. Ето защо, по пътя за окото закачи жълт филтър. Осветлението се настройва по метода на Колер, с едно изключение. Диафрагмата на кондензатора трябва да бъде напълно отворена. В проучването е важно да се използват нефлуоресцентни потапящо масло. За да се намали собствената му емисия, към него се добавя нитробензен (2-10 капки / 1 g).

Луминисцентна микроскопия: приложение в микробиологията

Предимствата на този тип изследвания са:

1. Възможност за получаване на цветни изображения.
2. Високо контрастно ниво на самоизлъчващи се елементи на черен фон.
3. Откриване и откриване на локализация на отделни видове вируси и микроби.
4. Възможност за изучаване на прозрачни и непрозрачни живи организми.
5. Проучването на жизнените процеси в тяхната динамика.

Необходимо е също така да се каже, че флуоресцентна микроскопия насърчава най-добрите методи за хистология и цитохимия, бързо диагностициране.