Радиоимунен анализ в микробиологията: приложение, механизъм

Съвременната медицина има специфични методи за диагностика, които позволяват да се определи етиологията на заболявания при хората, основаващи се на определяне на патогена генетично чужди вещества, които стимулират имунен отговор, нуклеинови киселини, и също се измества имунната и алергичен характер, които се дължат на неговото действие. Днес RIA се използва широко в имунологията и вирусологията, т.е. радиоимуноанализ, целите на формулирането, компонентите, чийто курс разглеждаме в тази статия. Този анализ е в състояние да открива антигени в резултат на тяхното взаимодействие с антитела.

дефиниция

RIA е метод за диагностициране на биологично активни вещества в течности въз основа на реакциите на антигени с антитела, когато радионуклид-белязани аналози на вещества, които имат специални свързващи системи. След взаимодействието им се образува имунен комплекс, който се отделя и изследва заради неговата радиоактивност. Това е известно имунорадиометричен анализ се извършва с използване на стандартни комплекти реагенти.

Всеки реагент е в състояние да определи концентрацията на едно конкретно вещество. Биологичната течност, взета от човек, се смесва с реагента, след инкубационния период се отделя свободната и свързаната радиоактивна субстанция, след което се извършва радиометричността и изчисляването на резултатите. За етикетиране на вещества се използва изотоп на йод. Той е етикетиран и добавен в определена сума.

приложение

Приложение за радиоимунологично изследване има широка медицина и микробиология. С негова помощ се извършва диагностика на сърдечни и съдови заболявания, заболявания на ендокринната система и други системи на тялото. Също така RIA често се използва за идентифициране на причината за безплодие, патологията на развитието на плода. В онкологията този анализ се провежда, за да се определят маркерите на неоплазмите, за да може да се наблюдава ефективността на лечението. В имунологията RIA се използва за изследване на наличието на имуноглобулини, ензими, протеини и т.н. в кръвта. Днес този анализ ви позволява да идентифицирате концентрацията на различни хормони на милионна част от един грам. По този начин, тест радиоимуноанализ кръвшироко използвани в кардиологията, онкологията, ендокринологията, гинекологията и вирусологията.

RIA методи

Приема се да се разграничат няколко метода за анализ, в зависимост от естеството на реакцията:

1. Неконкурентен метод се характеризира с такива реакционни компоненти като стандартни и откриваеми антигени, буферен разтвор, антитела, които са белязани с изотоп, определени антитела, които се свързват със сорбента. Към антителата се добавя антиген, който се изследва. След инкубацията се появяват комплекси антиген-антитяло, сорбентът се промива, добавят се белязаните антитела, които се свързват с антигена в комплекса. Радиоактивността зависи от концентрацията на антигена, който се изследва.
2. Конкурентно радиоимунологично изследване се дължи на антигенната конкуренция. Тук има реакционни компоненти като контролни и откриваеми антигени, буферен разтвор, определени антитела, които се свързват със сорбента, както и изотопно белязан антиген. Диагнозата започва с инжектирането на антигена, който се изследва. На сорбента се образува комплекс антиген-антитяло. След това сорбентът се промива и се въвежда белязаният антиген. В този случай той влиза в контакт с антитялото. Чрез броячите се измерват реакцията и радиоактивността. Той ще бъде обратно пропорционален на количеството антиген в пробата.
3. Непряк метод е най-често срещаното. В този случай радиоимунен анализ на компонентите Реакцията е като контролен и тестов серум, антигени или антитела, които са свързани към сорбента, антитела, белязани с изотопи, буферни разтвори. Антителата или антигените, които са диагностицирани, реагират с антигени или антитела, които са свързани със сорбента. След това инкубатът се отстранява, въвеждат се белязаните антитела, които се свързват към комплексите антиген-антитяло.

Метод на анализ

Така че радиоимунният анализ се извършва с помощта на специални реактиви. Комплектите са стандартни, така че не се допускат грешки или нередности. Резултатите от диагнозата са надеждни. Анализът се провежда сутрин, като за тази цел човекът приема венозна кръв. В лабораторията серумът се отделя от кръвта, който ще се използва за RIA. Този серум се смесва с реагентите. Получената смес се инкубира при определена температура в термостат.

Получената смес се разделя от свободни и свързани изотопи. След това полученият материал се изследва и резултатите се изчисляват. Механизмът на радиоимуноанализ има няколко варианта. Процедурата, описана по-горе, е RIA течна фаза, тъй като всички компоненти имат течно състояние. Има RIA и твърда фаза, където антителата се поставят в носител, който не се разтваря в течността.

Наличие на диагностика

Използването на този метод на диагностика в медицината всяка година става все по-популярно. Наскоро, имунорадиометричен анализ се превръща в стандартен метод за диагностика, който може да бъде определен от лекаря при извършване на окончателната диагноза. Дълго време този вид анализ се извършва само в лаборатории, днес той се е превърнал в обикновен метод на изследване. Но АРВ изисква използването на скъпо оборудване (гама-броячи), а комплектите реагенти имат кратък период на експлоатация. Всичко това е основният недостатък на такъв анализ, който определя неговата скъпа цена.

Освен това наскоро АРВ започна да измества по-модерни методи на изследване, които не изискват взаимодействие с изотопи. Такива опасения ензимен имуноанализ. По този начин RIA е добре дошъл в много клиники. В големите градове и диагностичните центрове отдавна се използва, но в обикновените болници в малките градове този анализ почти не се използва поради високата цена.

Предимства на RIA

Радиоимунен анализ има много предимства. Тя е доста специфична и има висока чувствителност, която позволява да се определи наличието на биологично активни вещества в невероятно малки количества. Този анализ е много прост, от човека се изисква само да преминава венозна кръв. Резултатите от теста са 100% точни и готови на следващия ден. Също така, RIA може лесно да бъде автоматизирана. По този начин, този анализ ни позволява да идентифицираме протеини, които са продукти на жизнената активност на инфекциозните бактерии, което показва наличието на инфекция в тялото.

Диагноза във вирусологията

Най-обещаващото RIA е за вирусологията, тъй като позволява в кратко време да се идентифицират вирусни патогени. Това се дължи на факта, че наскоро честотата на различни инфекции нараства, които се разпространяват с висок процент, причинявайки смърт сред хората. Това важи особено за държави, които нямат голямо социално и икономическо развитие (Далечния изток), то е просто незаменима тук радиоимунологично. микробиология Той също така прилага този диагностичен метод за откриване на инфекциозни заболявания, които причиняват патогенни бактерии. Например RIA се използва широко за откриване на коремен тиф. В първите дни на заболяването преди назначаването на лечението е необходимо да се проведе изследване на изпражненията и повръщането. Резултатите от диагнозата обаче ще бъдат получени след дълго време. Тук RIA идва за спасяване, анализът позволява да се идентифицира патогенът на болестта за кратко време. Лицето дава кръв, а на следващия ден резултатите от проучването вече са готови. Този анализ помага при формулирането на точна диагноза.

резултати

Радиоимунологичният анализ понастоящем е един от най-чувствителните методи за диагностика. Използва се за анализиране на всяко вещество, срещу което могат да се произвеждат антитела. Този метод прави възможно да се правят много проби в най-малък обем течност, която се изследва, а също и да се записват резултатите в най-кратки срокове, тъй като те могат да бъдат напълно автоматизирани. Този анализ е разработен през 50-те години на миналия век от Соломон Берсън. Тридесет години по-късно тя стана широко разпространена. Досега RIA няма сто процента алтернатива, тъй като анализът има висока чувствителност. RIA се използва в различни отрасли на медицината, както и в микробиологията и вирусологията.

Най-накрая

Използването на метода във вирусологията е много актуално днес, тъй като дава възможност да се изследва разпространението на инфекции, да се направи точна диагноза и да се предпише специфично лечение. Особено този проблем е от значение за страни, които имат ниско ниво на икономика и социално развитие. Също така, този анализ ви позволява да идентифицирате броя на хормоните и ензимите в човешкото тяло. За да се получат надеждни резултати, изследователят трябва само да дари кръв за анализ. Медицината не стои неподвижна, а заедно с радиоимунологията се появяват и нови методи на изследване, но RIA продължава да бъде един от водещите в медицинската диагностика.