Бактериологичен метод на изследване: етапи, цели, характеристики

Изследването на бактериите е от голямо практическо значение за човека. Към днешна дата са открити голям брой прокариоти, които се различават един от друг по отношение на патогенността, разпределението, формата, размера, броя на фланела и други параметри. За подробно изследване на този щам се използва бактериологичен метод.

Какви са методите за анализ на бактериални клетки?

За да се определи дали бактериите са патогенни, културата се изпитва по различни начини. Сред тях:

1. Бактериоскопичен метод.

2. Бактериологичен метод.

3. Биологичен метод.

Бактериоскопични и бактериологични изследователски методи въз основа на работата на прокариотни клетки като биологичен анализ е необходимо да се изследва влиянието на тези клетки в живия организъм на опитни животни. Според степента на проявление на тези или други признаци на заболяване учен да извеждат присъствието или отсъствието на патогенни бактерии в пробата, както и тяхното естествено разпространяват в тялото на животното, за тяхната култура и се използва другаде.

Бактериологичният метод на изследване се различава от бактериоскопския метод. В първата се използва специално подготвена култура на живи прокариоти за анализ, когато втората работи с мъртви или живи клетки върху плъзгач.

Етапи на бактериологичния метод на изследване. микробиология

Принципът на изучаване на свойствата на бактериалната култура може да бъде полезна за микробиолози, учени, които поставят за цел да изследва клетките-, както и за лаборатория, чиято задача е да се определят патогенни или не-патогенни бактерии, а след диагноза на пациента.

Методът на изучаване на бактериите е разделен на три етапа:

1. Изолиране на бактериите от оригиналната проба.

2. Сеитба на бактерии и култивиране на чиста култура, изследване на нейните свойства.

3. Подробно изследване на бактериални клетки.

Първият етап

Пробата или намазката се взема от свободната повърхност на средата или от пациента. По този начин получаваме "коктейл" от различни видове бактерии, които трябва да бъдат засети на хранителна среда. Понякога става възможно незабавно да се идентифицират необходимите бактерии, като се знае къде се разпространяват в тялото.

След два или три дни, необходимите колонии се подбират и се поставят върху твърдата среда на петриеви блюда с помощта на стерилен контур. Много лаборатории работят с епруветки, в които може да има твърда или течна хранителна среда. Също така е и бактериологичният метод за изследване в микробиологията.

Вторият етап

След получаване на отделни колонии от бактерии се извършва директен макро и микроанализ. Измерват се всички параметри на колониите, се определя цветът и формата на всеки от тях. Често се извършва чрез преброяване на колонии върху петриева чиния и след това в изходния материал. Това е важно при анализа на патогенните бактерии, чийто брой зависи от степента на заболяването.

Бактериологичният метод на изследване, вторият етап от който е да се изследват отделни колонии от микроорганизми, може да бъде свързан с биологичен метод на бактериален анализ. Друга цел на работата на този етап е да се увеличи количеството на изходния материал. Тя може да бъде направена на хранителна среда и е възможно да се проведе експеримент in vivo в живите експериментални организми. Патогенните бактерии ще се размножават и в резултат на това кръвта ще съдържа милиони прокариотни клетки. От взетата кръв е лесно да се подготви необходимия работен материал за бактериите.

Третият етап

Най-важната част от изследването е определянето на морфологичните, биохимичните, токсигенните и антигенните свойства на бактериалната култура. Работата се извършва с предварително "пречистени" култури върху хранителна среда, както и с препарати (често оцветени) под микроскоп.

Задайте членство на патогенни бактерии или опортюнистични до определена класификационна група, както и да се определи тяхната лекарствена резистентност позволява бактериологично изследователски метод. Етап 3 - антибиотици, т.е. анализ на поведението на бактериални клетки в съдържание на лекарства в околната среда ...

Проучването на устойчивостта на културата към антибиотик е от голямо практическо значение, когато е необходимо да се предпише за определен пациент необходимите и най-важните ефективни лекарства. Тук и бактериологичният метод на изследване могат да помогнат.

Какво представлява хранителната среда?

За развитието и възпроизводството на бактериите трябва да бъдат предварително приготвени хранителни среди. По последователност те могат да бъдат течни или твърди, а по произход - растителни или животински.

Основни изисквания за хранителните среди:

1. Стерилност.

2. Максимална прозрачност.

3. Оптимална киселинност, осмотично налягане, активност на водата и други биологични количества.

Приготвяне на изолирани колонии

1. Методът на Drigalsky. Състои се от това, че се прилага бактериален цикъл с намазка с различни видове микроорганизми. Този цикъл се извършва на първата петриева чиния с хранителна среда. Освен това, без да се променя цикъла, методът на остатъчния материал се извършва на втората и третата плочи на Petri. Така че, на последните проби от колонията, бактериите няма да се засяват твърде плътно, като по този начин се опрости възможността за намиране на бактериите, необходими за работа.

2. Методът Koch. Използва тръби с разтопена хранителна среда. Поставя се цикъл или пипета с намазка от бактерии, след което съдържанието на тръбата се изсипва върху специална плоча. Агарът (или желатинът) се замразява след известно време, а в дебелината му лесно се намират необходимите колонии от клетки. Важно е преди да започнете да разреждате сместа от бактерии в епруветките, така че концентрацията на микроорганизмите да не е много голяма.

Бактериологичният метод на изследване, етапите на които се основават на изолирането на желаната бактериална култура, не се осъществява без тези два метода за намиране на изолирани колонии.

antibiotikogrammy

Визуално реакцията на бактериите към лекарствата може да се види по два практически начина:

1. Методът на хартиените дискове.

2. Разреждане на бактерии и антибиотици в течна среда.

Методът на хартиения диск изисква култура от микроорганизми, отглеждани на твърда хранителна среда. На тази среда се поставят няколко кръгли хартии, импрегнирани с антибиотици. Ако лекарството успешно се справи с неутрализацията бактериални клетки, След такава обработка ще има място без колонии. Ако реакцията на антибиотика е отрицателна, бактериите ще оцелеят.

В случай на използване на течна хранителна среда, първо се приготвят няколко епруветки с култура от бактерии с различна степен на разреждане. Към тези епруветки се добавят антибиотици и през деня те наблюдават процеса на взаимодействие на веществото и микроорганизмите. В крайна сметка се получава качествена антибиотикограма, от която може да се прецени ефективността на лекарството за дадена култура.

Основни задачи на анализа

Тук са изброени целите и етапите на бактериологичния метод на изследване.

1. Получете изходния материал, който ще се използва за изолиране на бактериални колонии. Това може да бъде размазване от повърхността на всеки предмет, лигавица или кухина на човешкото тяло, кръвен тест.

2. Култивиране на култура върху твърда хранителна среда. След 24-48 часа в петриево блюдо можете да намерите колонии от бактерии от различни видове. Избираме необходимите морфологични и / или биохимични критерии и извършваме по-нататъшна работа с него.

3. Възпроизвеждане на получената култура. Бактериологичният метод на изследване може да се основава на механичен или биологичен метод за увеличаване броя на бактериалните култури. В първия случай работата се извършва с твърда или течна хранителна среда, върху която бактериите се размножават в термостат и образуват нови колонии. Биологичният метод изисква естествени условия за увеличаване на броя на бактериите, така че изпитваното животно е заразено с микроорганизми тук. Няколко дни по-късно много прокариоти могат да бъдат намерени в кръвна проба или смазка.

4. Работете с пречистена култура. За да се определи позицията на таксономичния бактерии, както и тяхната принадлежност към патогени, е необходимо да се проведе задълбочен анализ на клетки на базата на морфологични и биохимични характеристики. В проучването на патогенни микроорганизми, които са групи е важно да се знае каква е ефективността на действието на антибиотици.

Това е обща характеристика на бактериологичния метод на изследване.

Характеристики на анализа

Основното правило за провеждане на бактериологични изследвания е максималната стерилност. Ако тече работа с епруветки, култури и трансплантации на бактерии трябва да се извършват само върху нагрят спирт.

Всички етапи на бактериологичния метод на изследване изискват използването на специална контур или пипета Pasteur. И двата инструмента трябва да бъдат предварително обработени в пламъка на спиртната лампа. Що се отнася до пипетата Pasteur, след това преди термична стерилизация е необходимо да счупите върха на пипетата с пинсети.

Техниката на засяване на бактериите също има свои собствени характеристики. Първо, когато се засяват в твърда среда, извършете бактериална бримка над повърхността на агара. Веригата, разбира се, вече трябва да има проба от микроорганизми на повърхността. Също се практикува сеене в средата на култивиране, в който случай цикълът или пипетата трябва да достигнат до дъното на петриевата чиния.

При работа с течни среди се използват тръби. Важно е да се уверите, че течността не докосвайте ръбовете на лабораторна стъклария или корк и използвани инструменти (капкомер, пантите), не докосвайте чужди предмети и повърхности.

Значението на биологичния метод на изследване

Анализът на проба от бактерии има практическо приложение. На първо място бактериологичният метод на изследване може да се използва в медицината. Например, необходимо е да се изследва микрофлората на пациента, за да се установи правилната диагноза и да се направи правилен курс на лечение. Тук помага антибиотикограмата, която ще покаже активността на лекарствата срещу причинителя на заболяванията.

Анализът на бактериите се използва в лабораторията за определяне на такива опасни заболявания като туберкулоза, повтарящ се тиф или гонорея. Използва се и за изследване на бактериалния състав на сливиците, кухините на органите.

Може да се използва бактериологичен метод за изследване за определяне на замърсяването на околната среда. Според количествен и качествен състав на намазка от повърхността на обекта се определя от степента на заетост на средата от микроорганизми.